放大
缩小
默认结核病是由结核分枝杆菌感染引发的慢性传染病，可累及肺、淋巴、骨骼等多器官系统。据《世界卫生组织全球结核病报告2024》统计，全球每年新发结核病例超千万例，其中利福平耐药结核（RR-TB）/耐多药结核（MDR-TB）占比约5%。根据《肺结核诊疗指南（2020年版）》，实验室诊断需遵循“病原学优先、多技术联合”原则，结合临床特征与流行病学史综合判断。本文系统解析结核病实验室诊断方法的临床应用。
1.涂片镜检，一线初筛方法
操作规范：按照《痰涂片镜检标准化操作及质量控制手册》，需采集患者至少3份深部痰液（清晨痰、夜间痰、即时痰），或胸腔积液、尿液等标本，经抗酸染色后显微镜观察。结核分枝杆菌染色后呈红色细长杆菌形态，若镜检发现典型抗酸杆菌，则代表抗酸杆菌阳性，需记录菌量分级（如1+至4+），加号越多代表细菌负荷越高。
临床价值：适用于所有疑似肺结核患者的初始筛查，操作简便、成本低。
局限性：灵敏度受限。仅能检测标本中≥5000-10000CFU/ml的菌量，若患者咳痰不规范或标本含菌量低，易出现假阴性；特异性不足。无法区分结核分枝杆菌与非结核分枝杆菌（NTM），也不能鉴别活菌与死菌；技术提示：涂片镜检阳性仅提示抗酸杆菌感染，需结合培养或分子检测确诊；涂片阴性不可排除结核病，需进一步行结核菌培养或XpertMTB/RIF检测。
2.结核菌培养，确诊的重要病原学依据
结核菌培养是诊断结核病的核心病原学方法，推荐使用改良罗氏固体培养基（培养周期4-8周）和Middlebrook7H9液体培养基（1-2周可报阳性）联合培养。
操作流程：标本处理，痰液需经NaOH或N-乙酰半胱氨酸消化处理，减少杂菌污染；鉴定与药敏，培养阳性菌株需通过PNB/NAP
试验区分结核与非结核分枝杆菌，并进一步进行药物敏感性试验（DST），检测对异烟肼、利福平等一线药物的敏感性。
临床优势：灵敏度高于涂片镜检，可检测低载量菌(≥10-100CFU/ml）；为耐药结核诊断提供直接依据，指导临床精准用药。
局限性：培养周期长，需生物安全二级（BSL-2）实验室，基层普及难度大。
3.分子生物学检测，快速诊断与耐药筛查技术
（1）聚合酶链反应（PCR）技术
①原理与应用：通过扩增结核分枝杆菌IS6110等特异性DNA片段，实现快速检测。
②应用场景：适用于菌阴肺结核、结核性脑膜炎（脑脊液标本）、儿童结核病等疑难病例，尤其对难以获取高质量标本者价值显著；③质量控制：需使用内对照排除PCR抑制物干扰，避免交叉污染导致假阳性。
（2）XpertMTB/RIF检测（实时荧光定量
PCR）
①技术优势：是一种基于实时荧光定量PCR技术的分子诊断方法。操作便捷，2小时内同步完成结核分枝杆菌检测与利福平耐药突变（rpoB基因）筛查；基层适用性，为WHO推荐的一线快速诊断工具，尤其适用于HIV合并结核患者及资源有限地区。②应用局限性：对低载量菌（如肺外结核脑脊液标本）灵敏度较低；检测成本较高，需搭配生物安全柜使用。③应用建议：肺外结核标本（如淋巴结穿刺液）检测前需进行离心富集，提高阳性率。
4.免疫学检测——辅助鉴别感染状态
（1）结核菌素试验（PPD）
①操作规范：将0.1ml（5IU）PPD注射至前臂掌侧皮内，48-72小时观察结果，测量硬结直径（非红肿范围）。硬结直径＜5mm为阴性；硬结直径5-9mm为弱阳性；硬结直径10-19mm为弱阳性（提示既往感染或卡介苗接种）；硬结直径≥19mm或伴水疱/坏死为
强阳性（成人需高度怀疑活动性结核）②影响因素：假阳性，卡介苗接种史、非结核分枝杆菌（如堪萨斯分枝杆菌）感染；假阴性，免疫缺陷者（如HIV患者CD4+＜200/μl）、重症结核、糖皮质激素使用者。③技术定位：仅用于结核感染筛查，不可作为确诊依据，免疫功能低下者慎用。
（2）γ-干扰素释放试验（IGRAs）
①检测原理：通过酶联免疫吸附试验（ELISA）或荧光免疫法检测全血或外周血单个核细胞（PBMC）刺激后释放的γ-干扰素水平，识别结核分枝杆菌特异性抗原（ESAT-6/CFP-10）反应。②技术优势：特异性＞95%，受卡介苗接种和多数NTM感染影响小；可区分活动性结核与潜伏感染（需结合临床）。③局限性：成本较高，需冷链运输标本，基层医疗机构普及度低。④应用推荐：优先用于卡介苗接种史者、HIV感染者、密切接触者的潜伏结核感染（LTBI）筛查。
放大
缩小
默认