揭开病理切片制作的神秘面纱

在医院的诊疗过程中,当医生怀疑患者身体出现病变,尤其是可能涉及肿瘤等严重疾病时,常常会提到 “做病理检查”。而病理检查的核心,就是那一张张看似薄薄的病理切片。很多患者和家属都会好奇,这小小的切片是如何制作出来的?它又为何能成为医生判断病情的 “金标准”?今天,我们就来揭开病理切片制作的神秘面纱,带大家了解这背后复杂却严谨的过程。

病理切片:医生诊断的 “火眼金睛”

在了解病理切片的制作过程之前,我们首先要明白它的重要性。病理切片就像是医生的 “火眼金睛”,能够帮助医生清晰地观察到人体组织细胞的细微变化,从而准确判断病变的性质、类型和程度。

比如,当患者乳腺出现结节,医生无法通过影像学检查确定结节是良性还是恶性时,就需要通过穿刺等方式获取少量结节组织,制作成病理切片。病理医生在显微镜下观察切片中的细胞形态、结构等特征,如果发现细胞出现异常增殖、形态怪异等情况,就能判断可能是恶性肿瘤,进而为临床医生制定治疗方案提供关键依据。不仅如此,病理切片还能为后续的治疗效果评估和病情监测提供支持。

病理切片制作:多步骤的 “精细活儿”

病理切片的制作并非简单地将组织切成薄片,而是一个包含多个复杂步骤、需要高度耐心和专业技巧的过程,整个过程就像在打造一件精密的 “艺术品”,每一步都不能有丝毫马虎。

第一步是组织取材与固定。当临床医生获取患者的病变组织(如手术切除的肿瘤组织、穿刺获取的少量组织等)后,会将其送到病理科。病理医师首先要对组织进行取材,根据组织的大小、形态和病变可能存在的部位,选取具有代表性的一小块组织(通常大小不超过2cm×2cm×0.3cm )。随后,将取材后的组织放入固定液中进行固定。这个固定过程通常需要 6-24 小时,具体时间会根据组织的大小和类型进行调整。

第二步脱水透明。固定后的组织要经历一系列梯度酒精的洗礼。这个过程如同组织在穿越分子迷宫:70%酒精初步脱水,80%酒精进一步浓缩,95%酒精驱赶水分,最后是无水酒精完成终极脱水。每个浓度梯度停留1—2小时,确保水分被彻底置换。

随后进入透明阶段,二甲苯溶液取代酒精的位置。这个步骤不仅让组织变得透明如水晶,更重要的是为后续浸蜡打开通道。二甲苯处理需要严格控时,过长会导致组织脆化,过短则影响浸蜡效果。现代病理实验室已逐步采用环保型透明剂替代二甲苯,在保证效果的同时减少职业暴露风险。

第三步浸蜡,给组织穿上石蜡铠甲。经过脱水透明的组织被转移至熔化的石蜡中,这个过程称为“浸蜡”。60-62℃的石蜡浴中,组织孔隙被石蜡充分填充,起到支撑作用。这个过程就像给脆弱的组织穿上防弹衣,使其在后续切片过程中保持完整形态。

第四步是组织包埋与切片。浸蜡后的组织需要进行包埋,就是将其放入特制的模具中,再倒入融化的石蜡,待石蜡冷却凝固后,形成一个蜡块。这个蜡块能够为组织提供稳定的支撑,方便后续切片。包埋完成后,病理技师会将蜡块安装在切片机上,用锋利的切片刀将蜡块切成厚度仅为 3-5 微米的薄片(1 微米相当于 1 毫米的千分之一),这个厚度比头发丝还要细很多。切片过程中,技师需要精准控制切片机的速度和力度,确保切出的薄片完整、平整,没有褶皱和破损。

包埋环节需要技师的“火眼金睛”:要确保组织块平直嵌入蜡块中央,切面朝下;对于小标本要多个组合包埋提高效率;对于骨组织需要先脱钙处理才能包埋。包埋质量直接影响切片质量,优秀的技师能将组织包埋得如同艺术品般规整。

第五步是烤片及常规染色。因为切片上的组织有石蜡包裹,所以必须把蜡烤干了才能进行下一步的上色。烤好的切片需要进行一系列的脱蜡、梯度酒精脱水后就可以给切片进行红蓝染色(HE染色)啦。

第六步是封片与保存。染色完成后的切片需要进行封片,就是在切片上滴加适量的封片剂,然后盖上盖玻片,使切片与空气隔绝,防止切片褪色和受损,同时也能使切片更加透明,便于观察。封片完成后,将切片放入通风处晾干,待封片剂凝固后,一张完整的病理切片就制作完成了。制作好的病理切片会被妥善保存在病理科的切片柜中,以便后续供病理医师查阅和复查。

整个病理切片制作过程需要24～48小时的时间甚至更长,这也是为什么标本送检后2～3天甚至更久才能拿到病理报告的原因。

结语

病理切片制作是门“失之毫厘,谬以千里”的精密技术。每个步骤都凝聚着病理技师的匠心,每个细节都可能影响最终诊断。当我们在显微镜下看到排列整齐的细胞结构时,很少有人想到这背后是如此复杂的工艺流程。这项技术不仅为疾病诊断提供金标准,更是现代医学精准治疗的基础。