免疫检测技术：病理侦探的好帮手

病理科不时会收到类似反馈：临床医生说：“病理科以前通过HE染色就能做出诊断了，为什么现在动不动就要做免疫组化，是不是不做免疫组化就不能下诊断了？”患者说：“临床医生说你们病理科诊断不出来，要我们借切片去外面会诊”。看病理报告：“考虑…（疾病），建议行免疫组化检测…（项目）进一步协助诊断”。病理医师：“？？？……（无言以对）”。

那么，免疫组化是什么？在病理诊断中，免疫组化有什么作用呢？

免疫检测技术是在组织切片或细胞涂片上利用特异性抗体在原位对相应抗原（可以是细菌、病毒、肿瘤细胞、自身抗原等）进行定性、定位、定量检测并将其可视化的技术。分为免疫化学和免疫荧光两类，可再细分为组织检测和细胞检测，即包括免疫组织化学（简称免疫组化，病理诊断中最常用）、免疫细胞化学及免疫荧光（因免疫组织荧光和免疫细胞荧光这两个词汇未广泛应用）。

在病理诊断中，免疫检测技术的作用主要有三：辅助诊断、指导治疗和评估预后。

辅助诊断

感染性疾病诊断

通过利用特定抗体，如幽门螺杆菌（HP）抗体、人乳头状瘤病毒（HPV）抗体、乙型肝炎病毒（HBV）表面抗原或核心抗原的抗体、EB病毒（潜伏膜蛋白1）等检测病原体相关抗原，可以明确感染的病原体类型。

肾脏疾病及自身免疫性疾病病理诊断

利用荧光素标记的抗体检测肾脏或皮肤组织中的免疫球蛋白IgA、IgG、IgM，补充C3、C1q和纤维蛋白，可协助诊断肾脏疾病（原发性膜性肾病、膜性狼疮性肾炎、…）及皮肤疾病（天疱疮、疱疹样皮炎、…）。

肿瘤诊断

是免疫检测技术在病理诊断中最主要的应用。不同的肿瘤，甚至同一种肿瘤的不同亚型的生物学行为、治疗反应和预后都可能有很大不同，但许多肿瘤在组织学上非常相似，相当一部分病例单靠传统的HE染色技术难以做出明确的诊断。免疫检测技术可从以下几方面辅助肿瘤病理诊断：

1.明确细胞类型

不同类型的细胞所表达的抗原不同，其细胞产物亦不同，利用相应的抗体进行检测可确定细胞类型。如CK（Pan）是上皮细胞的广谱标记物；LCA 是造血细胞的特异性标志物，是区别淋巴瘤、白血病与非造血组织肿瘤的常用标志物；CT是甲状腺滤泡旁细胞分泌的激素，可用于甲状腺髓样癌的诊断，…。

2.确定病变性质

同一种细胞的不同发育阶段所表达的抗原不尽相同，其细胞产物亦有所不同，利用相应的抗体进行检测可协助确定病变的良恶性。例如CK5在乳腺干细胞、中间腺上皮及中间肌上皮中表达，在终端腺上皮及终端肌上皮中不表达，根据CK5的表达模式及病灶大小可协助鉴别乳腺导管普通型增生、非典型增生抑或低级别导管内癌。

因此，通过合理利用不同的抗体组合，免疫检测技术可进一步辅助肿瘤的以下诊断：

3.明确肿瘤起源

组织学上的低分化/未分化肿瘤，可能为上皮、间叶或淋巴造血来源，综合多种抗体的检测可确定其起源。

4.协助判断肿瘤原发病灶

转移瘤与原发瘤通常具有共同的抗原表达性，利用多种抗体检测可协助判断来源不明的转移瘤的原发病灶。如骨转移癌若TTF-1和NapsinA同时阳性，提示肺腺癌转移。

5.确定肿瘤分期

肿瘤分期与是否浸润、有无脉管侵犯、有无淋巴结转移等密切相关，有时在HE染色切片中很难判断，免疫组化染色可以较清楚地观察到。如通过CK5、P63、Calponin的染色可协助判断肌上皮是否缺失从而明确乳腺癌有无浸润；通过CK（Pan）、CD68染色可从淋巴结的窦组织细胞中甄别出单个的转移性癌细胞。

指导治疗

正确的疾病病理诊断，可帮助临床确定治疗方案。

以肿瘤为例，其传统治疗包括手术、化疗、放疗和内分泌治疗，病理类型不同，治疗方案不同，另外NK/T细胞淋巴瘤的一线治疗方案为P-Gemox，经典型霍奇金淋巴瘤的为ABVD，…。

随着医学科学的进步，肿瘤的治疗进入了靶向治疗和免疫治疗的时代，CD20阳性的B细胞性淋巴瘤可使用靶向药美罗华治疗，dMMR结直肠癌患者可从PD-1/PD-L1治疗中获益，…。治疗前均需进行相应的抗体检测。

评估预后

除了前述的肿瘤分期外，肿瘤增殖活性对评估患者的预后亦有重要参考价值，其免疫组化标记包括PCNA、Ki-67及多种生长因子受体等。

综上，免疫检测技术是病理侦探的好帮手，为疾病的诊断和治疗提供了有力的依据，让我们一起期待它在未来医学领域中的更多应用和突破！